Mô tả
TopSPEC® ASFV Multiplex qPCR Kit – Phát hiện và phân biệt ASFV
TopSPEC® ASFV Multiplex qPCR Kit (MQV-121) là bộ kit real-time PCR sử dụng công nghệ TaqMan probe để phát hiện virus dịch tả lợn châu Phi (African Swine Fever Virus – ASFV) và hỗ trợ phân biệt các chủng ASFV dựa trên các marker gene đặc hiệu.
Bộ kit phù hợp cho các phòng xét nghiệm thú y, cơ sở chăn nuôi, trung tâm kiểm nghiệm và đơn vị giám sát dịch bệnh cần phát hiện ASFV đồng thời đánh giá sự khác biệt giữa virus ASFV thực địa và các chủng vaccine nhược độc/xóa gene.
ASFV và vai trò của xét nghiệm real-time PCR
African Swine Fever Virus (ASFV) là virus DNA sợi đôi có vỏ, thuộc họ Asfarviridae. Virus gây bệnh dịch tả lợn châu Phi, một bệnh truyền nhiễm nghiêm trọng trên lợn nhà và lợn hoang dã.
Trong xét nghiệm ASFV, real-time PCR là kỹ thuật quan trọng để phát hiện vật liệu di truyền của virus trong các mẫu bệnh phẩm. Với các chương trình tiêm vaccine ASFV, nhu cầu phân biệt virus thực địa và các chủng vaccine nhược độc/xóa gene ngày càng trở nên quan trọng trong giám sát đàn và điều tra dịch tễ.
TopSPEC® ASFV Multiplex qPCR Kit có gì khác biệt?
Khác với các kit ASFV qPCR chỉ phát hiện sự hiện diện của virus, MQV-121 sử dụng nhiều mục tiêu phân tử để hỗ trợ:
- Phát hiện ASFV: thông qua marker VP72.
- Phát hiện ASFV genotype II: thông qua marker F1055L.
- Đánh giá các marker gene liên quan đến chủng xóa gene: I177L, MGF360-9L và MGF360-12L.
Thiết kế multiplex giúp thu nhận nhiều thông tin từ một quy trình xét nghiệm, phù hợp với nhu cầu giám sát ASFV trong bối cảnh có sử dụng vaccine.
Thông số kỹ thuật
| Thông số | Đặc điểm |
|---|---|
| Sản phẩm | TopSPEC® ASFV Multiplex qPCR Kit |
| Mã sản phẩm | MQV-121 |
| Kỹ thuật | Multiplex real-time PCR |
| Công nghệ | TaqMan probe |
| Mục tiêu ASFV | VP72 gene |
| ASFV genotype II | F1055L gene |
| Marker gene | I177L, MGF360-9L, MGF360-12L |
| Thể tích DNA mẫu | 5 µL |
| Thời gian PCR | Khoảng 1 giờ 30 phút |
| Chứng nội | Internal Control – IC |
| Bảo quản | -20°C |
| Hạn sử dụng | 12 tháng kể từ ngày sản xuất |
Các kênh huỳnh quang
ASFV Multiplex qPCR Mix A
- FAM: ASFV
- HEX: I177L gene
- Cy5: Internal Control (IC)
ASFV Multiplex qPCR Mix B
- FAM: MGF360-9L gene
- Texas Red: ASFV genotype II
- HEX: MGF360-12L gene
Việc diễn giải kết quả giữa các marker cần thực hiện theo hướng dẫn sử dụng và bảng interpretation của bộ kit.
Loại mẫu xét nghiệm
DNA sau tách chiết có thể được chuẩn bị từ các loại mẫu bệnh phẩm phù hợp trên lợn như:
lách, hạch amidan, hạch bạch huyết, thận, huyết thanh và máu toàn phần.
Chất lượng DNA đầu vào ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng phát hiện của phản ứng real-time PCR. Vì vậy nên sử dụng quy trình tách chiết DNA phù hợp với từng loại mẫu và kiểm soát chất lượng mẫu trước khi chạy PCR.
Thành phần bộ kit
- Bộ TopSPEC® ASFV Multiplex qPCR Kit bao gồm:
- ASFV Multiplex qPCR Mix A;
- ASFV Multiplex qPCR Mix B;
- Positive Control ASFV Multiplex;
- Negative Control;
- Internal Control (IC);
- ống PCR phù hợp cho phản ứng real-time PCR.
Quy cách đóng gói
- MQV-121.A: 50 tests – Master Mix chia sẵn.
- MQV-121.B: 50 tests – Master Mix chưa chia.
Hai lựa chọn giúp phòng xét nghiệm lựa chọn cấu hình phù hợp với tần suất chạy mẫu và quy trình vận hành hiện tại.
Khi nào nên sử dụng ASFV Multiplex qPCR?
- Bộ kit phù hợp khi phòng xét nghiệm cần:
- Phát hiện ASFV trong mẫu bệnh phẩm trên lợn;
- Giám sát ASFV trong đàn;
- Điều tra các trường hợp nghi nhiễm ASFV;
- Hỗ trợ phân biệt ASFV thực địa với các chủng vaccine nhược độc/xóa gene;
- Theo dõi ASFV trong chương trình giám sát dịch bệnh hoặc sau tiêm vaccine.
Kit tách chiết DNA khuyến cáo
Tùy loại mẫu, có thể kết hợp với:
- Kit ly trích DNA cho mẫu máu – phù hợp với mẫu máu toàn phần.
- Kit ly trích DNA/RNA virus – phù hợp với các mẫu cần thu hồi DNA virus.
Việc lựa chọn phương pháp tách chiết phù hợp giúp hạn chế chất ức chế PCR và cải thiện độ ổn định của kết quả.
Sản phẩm ASFV liên quan
Nếu nhu cầu chỉ là phát hiện sự hiện diện của ASFV mà không cần phân biệt các marker vaccine/xóa gene, có thể tham khảo Kit Real-time PCR phát hiện ASFV.
Nếu cần lựa chọn kit phù hợp với loại mẫu, máy real-time PCR đang sử dụng hoặc mục tiêu giám sát ASFV của phòng xét nghiệm, vui lòng liên hệ Cao Gia Biotech để được hỗ trợ kỹ thuật.
Câu hỏi thường gặp
1. Kit ASFV Multiplex qPCR khác kit ASFV qPCR thông thường như thế nào?
Kit ASFV qPCR thông thường chủ yếu được thiết kế để xác định mẫu có hay không có ASFV. ASFV Multiplex qPCR sử dụng thêm các marker gene để cung cấp thông tin phục vụ phân biệt và giám sát các nhóm virus khác nhau.
2. Kit có phát hiện ASFV genotype II không?
Có. Thiết kế MQV-121 hiện sử dụng marker F1055L để hỗ trợ phát hiện ASFV genotype II.
3. Loại mẫu nào có thể sử dụng?
Kit sử dụng DNA sau tách chiết từ các mẫu phù hợp trên lợn như máu toàn phần, huyết thanh, lách, hạch bạch huyết, hạch amidan và thận.
4. Có cần chứng nội khi xét nghiệm ASFV không?
Có. Internal Control giúp theo dõi quá trình xét nghiệm và hỗ trợ phát hiện các trường hợp phản ứng không đạt do vấn đề mẫu, tách chiết hoặc ức chế PCR.
